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問答題
【簡答題】測定多肽,一般采用什么柱子?流動相是乙腈和水,還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽,應(yīng)該怎么選擇柱子?
答案:
分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測定,也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。
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問答題
【簡答題】對于一根常用的c18柱,拿到一根新柱的時候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)?為什么要這樣做?
答案:
新柱活化,實(shí)際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進(jìn)行平衡,特別是測定分子量比較高的多肽...
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問答題
【簡答題】我在做方法開發(fā)的時候,用乙腈和水作為流動相,在調(diào)整梯度的時候發(fā)現(xiàn),剛開始用60%乙腈,RT為2.5分鐘,調(diào)到40%乙腈,RT沒有變化,30%也沒有變化,一直調(diào)到20%的時候,RT突然變到了約13分鐘,請問這是什么原因?我用的是離子交換柱。
答案:
離子交換柱的保留時間主要由洗脫液的離子強(qiáng)度和pH決定。
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