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問答題

【簡答題】用 EcoRI和 HindⅢ分別切割同一來源的染色體 DNA，并進(jìn)行克隆，在前者的克隆中篩選到 A基因，但在后者的克隆中未篩選到 A基因，請說明原因。

答案：原因是：HindⅢ的切點(diǎn)在 A基因內(nèi)。

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【簡答題】一個攜帶有氨芐和卡那霉素抗性基因的質(zhì)粒被僅在卡那霉素基因中有識別位點(diǎn)的EcoRI消化。消化物與酵母 DNA 連接后轉(zhuǎn)化對兩種抗生素都敏感的 E.coli 菌株。（1）利用哪一種抗生素抗性選擇接受了質(zhì)粒的細(xì)胞？（2）怎樣區(qū)分接受了插入酵母 DNA的質(zhì)粒的克?。?/h4>

答案：

（1）選擇Amp^r的轉(zhuǎn)化子；
（2）所需的克隆是Amp^r和Kan^r。任何能夠抗這兩種藥物的克隆都是自連的非重組質(zhì)粒。

【簡答題】插入失活和插入表達(dá)法篩選重組體的主要差別是什么？

答案：主要差別是：插入失活法是直接根據(jù)失活基因的表型變化來篩選重組體；插入表達(dá)是根據(jù)一個基因的失活引起另一個基因的表達(dá)表型來選...

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