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問(wèn)答題
【簡(jiǎn)答題】切口移位(nick translation)標(biāo)記探針的主要步驟有哪些?
答案:
(1)DNaseI造成切口;
(2)DNA聚合酶Ⅲ的 5’3’外切核酸酶進(jìn)行切割;
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問(wèn)答題
【簡(jiǎn)答題】你在做Southern 印跡分析,并且剛完成了凝膠電泳這一步。根據(jù)方案,下面一步驟是用 NaOH溶液浸泡凝膠,使 DNA變性為單鏈。為了節(jié)省時(shí)間,你略過(guò)了這一步,直接將DNA從凝膠轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜上。然后用標(biāo)記探針雜交,最后發(fā)現(xiàn)放射自顯影片是空白。錯(cuò)在哪里?
答案:
如果你的雜交探針是雙鏈的,可能因?yàn)樵诩尤腚s交混合物之前忘記將探針變性而得到空白的放射自顯影結(jié)果。
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問(wèn)答題
【簡(jiǎn)答題】點(diǎn)印跡與Southern 印跡相比,有何優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)?
答案:
兩種技術(shù)都可用于分析混合 DNA樣品中是否存在能與特定探針雜交的序列。點(diǎn)雜交比 Southern...
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